要做細(xì)胞的共聚焦觀察,但是細(xì)胞是新分離的細(xì)胞,如果直接加到蓋玻片上觀察細(xì)胞會(huì)流動(dòng),我們可以使用
共聚焦皿。采用加厚底面設(shè)計(jì),上蓋與下底寬度差大大減小,避免取用時(shí)無(wú)意揭開(kāi)或拿取不穩(wěn),采用醫(yī)用級(jí)無(wú)影膠水粘接而成保證對(duì)細(xì)胞無(wú)任何傷害,防止掉落,便于共聚焦顯微鏡觀察。用于激光共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)、熒光顯微實(shí)驗(yàn)和相差顯微實(shí)驗(yàn)等細(xì)胞培養(yǎng)觀察實(shí)驗(yàn),可用于活細(xì)胞的觀察。
共聚焦皿可用于多聚賴(lài)氨酸包被,具體步驟如下:
1、將濃度0.01%(100ug/mL)的多聚賴(lài)氨酸溶液加入玻底板或玻底皿中(爬片可置于普通皿內(nèi)進(jìn)行加液),以剛好蓋滿(mǎn)玻底(或玻片)為準(zhǔn),將上蓋蓋好,放到培養(yǎng)箱中(37℃ 5%CO2)包被30分鐘。
2、30分鐘后取出板或皿,用吸管將多余的多聚賴(lài)氨酸溶液吸出。換吸管,加入三蒸水,沒(méi)過(guò)底,沖洗三次,再將水吸出來(lái)。反復(fù)三次。整個(gè)過(guò)程需在無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行,并且保證吸管無(wú)菌。
3、將鋪好的板(或皿)放于培養(yǎng)箱待用。
共聚焦皿主要用于要求放大倍數(shù)高、培養(yǎng)器皿底面透光性能好的顯微實(shí)驗(yàn),如激光共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)、熒光顯微實(shí)驗(yàn)和相差顯微實(shí)驗(yàn)等。玻底培養(yǎng)皿底面薄,透光性能好, 滿(mǎn)足了上述實(shí)驗(yàn)的要求。同時(shí)玻底培養(yǎng)皿底面的小孔也減少了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中抗體等試劑的使用量。