Biorad電泳槽通過連續(xù)洗脫電泳技術(shù),能快速有效地分離生物分子。用于天然PAGE、SDS-APGE 或瓊脂糖凝膠電泳,制備電泳槽只需5 小時就能提供純化的蛋白、核酸及其它生物分子。所分離的生物分子以單獨(dú)的液相組分方式提供,并且數(shù)量足夠進(jìn)行測序、抗體生產(chǎn)、晶體學(xué)及其它下游應(yīng)用。分子從凝膠底端洗脫出來,進(jìn)入洗脫緩沖液流中,收集液體組分。
Biorad電泳槽包括電泳槽主體,主體分為上槽體和下槽體,上槽體的上部設(shè)置有鉑金絲電極,下槽體固定安裝在底座的上部,主體的左右兩側(cè)各設(shè)置有矩形玻璃板和夾緊裝置,夾緊裝置設(shè)置有包括旋轉(zhuǎn)螺栓、螺母、螺母支座和螺栓轉(zhuǎn)鈕形成一體結(jié)構(gòu),夾緊裝置關(guān)于主體對稱設(shè)置有兩個,并且夾緊裝置沿主體的中間橫向移動,本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)垂直電槽主體兩端的矩形玻璃板通過夾緊裝置進(jìn)行固定,很好地實(shí)現(xiàn)垂直電槽主體拆卸和安裝,并通過夾緊裝置中設(shè)置的夾板,一方面加大夾緊裝置與矩形玻璃板的接觸面積,另一方面減少了夾緊裝置旋轉(zhuǎn)螺栓中對矩形玻璃板局部壓傷損壞。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將膜從電泳槽中取出,稍加漂洗3次,每次5-10min;然后浸沒于封閉液中緩慢搖蕩1h。封閉是將轉(zhuǎn)印膜上坑坑洼洼的地方用BSA或脫脂奶粉填平,降低抗體的非特異性吸附產(chǎn)生很濃的背景。常用5%BSA和脫脂奶封閉,若是做磷酸化蛋白,只能用BSA,因?yàn)椋讨泻辛姿峄鞍住6忾]液濃度,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需摸索條件。蛋白面朝上,封閉2h,搖床速度不超過40,結(jié)束后直接進(jìn)一抗。