超濾離心管具有快速超濾功能,能夠達到較高的濃縮倍數,輕松實現從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產物。垂直設計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,并達到30倍的濃縮。
超濾離心管的使用方法:
1、將超濾內管插入所提供的一個微量離心管中。
2、向超濾管內管中加入不超過500μL的樣本,并蓋上蓋子。
3、將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉子中,讓蓋子的連接帶朝著轉子的中間,用一個類似的超濾管平衡。
4、離心結束后將整個超濾管從離心機中取出,取出內管。
5、為了回收濃縮后的溶質,將內管倒過來插在-個干凈的微量離心管中。放在離心機中,讓打開的蓋子朝著轉子的中間,用一個類似的超濾管進行平衡,超濾液可以保存在收集管中。
注意,當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要準確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發生沉淀為止。